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      先導抗體分子發現服務

      抗體藥是指以細胞、基因工程技術為主體的抗體工程技術進行制備,與靶抗原結合具有高特異性、有效性和安全性,臨床用于惡性腫瘤與自身免疫疾病等重大疾病,是發展迅速的生物制劑藥物。

      抗體藥的研發,從最初的確定靶點,到篩選先導分子,做臨床前研究,再到進入臨床1/2/3期試驗,以及完成最后的NDA申報,整個流程跑下來少說也要耗費10年的時間??v觀整個抗體新藥研發流程,先導抗體分子就是故事開始??梢哉f,能夠開發出針對特定靶點的先導分子的企業基本就拿到了新藥研發的入場券。華美生物一直致力于蛋白抗體的研發與生產,能夠為您的早期先導抗體分子發現提供一站式服務,加速您的藥物研發進程。

      華美生物先導抗體發現服務流程

      抗體功能檢測
      • ELISA
      • FACS
      • SPR
      • binning
      先導抗體交付

      一、原材料準備

      ● 藥靶蛋白表達

      華美生物擁有15年重組蛋白表達經驗,可提供從基因合成、載體構建到蛋白表達及純化的一站式服務。針對藥靶蛋白,在原有的五大重組蛋白表達系統(大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞、哺乳動物細胞無細胞蛋白表達系統)的基礎上,經過不斷探索與優化,華美生物現已推出四大優勢藥靶蛋白表達平臺,分別是病毒樣顆粒 (VLPs) 技術平臺、去垢劑技術平臺、Nanodisc技術平臺和Nanoparticle 表達平臺。

      病毒樣顆粒 (VLPs) 技術平臺-跨膜蛋白
      • 展示多次跨膜蛋白的天然構象,具有完整生物活性
      • 可提高免疫原性,打破機體自身的免疫耐受
      • 包膜VLPs中靶抗原豐度高于過表達細胞
      • 大小為100-150nm,是噬菌體展示的最佳靶點
      • 可用于免疫/ELISA/SPR/BLI,助力先導抗體發現
      Nanodisc技術平臺-跨膜蛋白
      • 近似于細胞膜環境,展示完整構象,保持生物活性
      • 不含去垢劑,適用于對去垢劑有干擾的實驗
      • 可直接用于噬菌體篩選(提供空nanodisc反篩)
      • 可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/細胞實驗
      去垢劑技術平臺-跨膜蛋白
      • 可全長表達多次跨膜蛋白,不僅僅只限于ECD表位
      • 可精確定量,區別于VLPs和Nanodisc平臺
      • 可應用于免疫/ELISA/SPR/BLI
      Nanoparticle 表達平臺-小分子量蛋白
      • 展示天然構象,具有完整生物活性
      • 可增強免疫反應
      • 可直接用于噬菌體篩選(提供空的Nanoparticle反篩)
      • 可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/細胞實驗

      ● 陽性抗體制備

      陽性抗體又稱藥物對照抗體,陽性抗體序列參考優先次序依次為:已上市的抗體藥、臨床階段(Ⅰ-Ⅲ)抗體藥、臨床前階段的抗體藥、FACS抗體。

      ● 穩轉細胞株構建

      穩轉細胞株是指通過穩定轉導持續穩定表達或干擾特定基因表達的細胞系。在抗體開發領域,穩轉細胞株可以作為免疫原刺激動物的特異性免疫反應,可針對多跨膜蛋白的靶點。此外,穩轉細胞株廣泛用于抗體結合和功能篩選實驗。華美生物可提供穩轉細胞株構建服務,具體服務內容如下:

      慢病毒包裝構建穩轉細胞服務
      序列 步驟 服務內容 周期
      1 表達載體構建 密碼子優化、全基因合成、構建慢病毒表達載體,質粒大抽 2-3周
      2 慢病毒包裝 將表達載體和輔助質粒共轉293T細胞,進行慢病毒包裝 1-2周
      3 Cell pool篩選及驗證 用相應篩選劑篩選出陽性細胞,檢測cell pool表達量 1-2周
      4 單克隆篩選及驗證 單細胞進行鋪板,并驗證單克隆表達量 3-4周
      5 單克隆凍存及QC 單克隆擴大培養、凍存、復蘇檢測活率及微生物污染 1-2周
      總時間 8-12周
      CELL POOL檢測
      單克隆篩選

      二、抗體制備

      ● 免疫動物選擇

      華美生物可提供多種免疫動物以滿足不同客戶的不同需求。

      ● 免疫方案制定

      多種抗原(小分子量蛋白,ECD,全長抗原,VLP抗原,穩轉細胞等)、多種宿主(小鼠,大鼠,兔子,羊駝等)、多種佐劑(弗氏佐劑,快速佐劑)可選;針對細胞和VLP抗原免疫有專門免疫方案,可增強免疫應答,提高抗體效價。

      三、抗體篩選

      ● 雜交瘤單抗技術

      華美生物具有十五年豐富雜交瘤單抗開發經驗,技術路線成熟,產品質量穩定可靠,高成功率。初步陽性率高達20%-40%左右,流式陽性率達到10%-20%左右,可滿足不同類型客戶需求。

      ● 噬菌體展示技術

      華美生物擁有多個百億級別天然噬菌體庫,包括羊駝天然庫、人源化納米庫、全人源庫和鼠源庫。庫品質高,正確插入率100%,篩選陽性率90%以上,可提供快速篩選服務,最快可2-4周內完成抗體篩選,親和力可達到nM級別。此外,我司還提供親和力成熟服務和抗體人源化改造,保證親和力和親本在一個數量級。

      四、抗體功能檢測

      針對篩選獲取的先導分子抗體,華美生物會根據客戶需求進一步做抗體功能檢測,包括抗原ELISA、細胞FACS、抗原SPR及抗原binning檢測??乖璄LISA和抗原SPR主要檢測抗原抗體的結合活性與親和力,細胞FACS檢測抗體與細胞的結合活性,抗原binning檢測鑒定篩選的先導抗體分子和陽性抗體識別的抗原表位是否一致 。

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