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      標準曲線的繪制

      標準曲線的繪制方法
       
      可以采用各種繪圖軟件來繪制ELISA標準曲線,下面以“Curve  Expert1.4”軟件為例,繪制ELISA標準曲線的方法如下;
      1.啟動“Curve  Expert”
      (點擊下載Curve Expert1.3.zip 或下載升級版Curve Expert1.4.zip)
      2.X軸輸入標準品的OD值,Y軸輸入所對應的濃度值,如圖:

       
      3.單擊[運行]  按鈕,出現如下對話框


      4.單擊[ok]按鈕,出現如下兩個對話框,關閉下面一個對話框
       


      5. 在對話框的右上角出現一些曲線的名稱,從“1”開始依次點擊曲線名稱,在右下角會出現相應擬合的曲線。
       
       
      6. 根據擬合的曲線選取ELISA擬合度最佳的曲線雙擊,出現如下對話框:
      注意:選擇系數(即“r”值)最好的曲線方程來進行運算。在下面的對話框
      右上角有“r”值 ,當“r”值越接近1擬合度越好



      7.按[Ctrl]鍵+[L]鍵,出現如下對話框:


      8.輸入標準的OD值,單擊[Calculate]按忸,即可得到待測蛋白的實際含量(標本稀釋了N倍,運算出的數值應在乘以N)。
       
      9. 如想得到ELISA擬合曲線的方程,可在步驟6的對話框空白處右擊,選擇”Information”


      10. 得到如下對話框:點擊“Copy”
      在你需要的位置粘貼即可得到如下數據:
      Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)
      Coefficient Data:
      a =   -21.531017
      b =  212.05019
      c =  -0.24054479
      d =  0.018060778


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